高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。
儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入檢測(cè)系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的“吸附-解吸”的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣本濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式輸出檢測(cè)結(jié)果。
高效液相色譜儀方便易用的流量和壓力校正功能,確保儀器的高精度和穩(wěn)定性;采用靜態(tài)電機(jī)控制電路,實(shí)現(xiàn)電機(jī)控制信號(hào)的自動(dòng)反饋跟蹤功能,有效提高電機(jī)控制精度,確保了泵的可靠性及穩(wěn)定性;通用樣品池設(shè)計(jì),微量與常量池之間更換方便。
高效液相色譜法適于分析沸點(diǎn)高、相對(duì)分子質(zhì)量大,受熱易分解的不穩(wěn)定有機(jī)化合物、生物活性物質(zhì)以及多種天然產(chǎn)物。局限性:
1.離效液相色譜法中需使用多種溶劑,其成本比氣相色譜法髙,且易引起環(huán)境污染;當(dāng)進(jìn)行梯度淋洗時(shí),操作比氣相色譜的程序升溫操作復(fù)雜。
2.高效液相色譜法中缺少像氣相色譜法中使用的熱導(dǎo)池檢測(cè)器,氫火焰離子化檢測(cè)器那樣的通用型檢測(cè)器。
3.髙效液相色譜法不能替代氣相色譜法去完成要求柱效達(dá)10萬塊理論塔板數(shù)以上的,組成復(fù)雜的石油樣品分析。也不能替代中、常壓柱色譜法去分析受壓易分解、變性的生物活性樣品。